老药新用，即利用已知药物治疗非适应症疾病的用法。通过挖掘已上市药物的新适应症，可大幅减少大量时间和资金成本，成为抗肿瘤药物研发的新思路与新方向。

今天小编给大家解读一篇发表在Science子刊ScienceImmunology（IF=13.44）的新鲜出炉的高分老药新用文章，TargetingmonoamineoxidaseAforTcell–basedcancerimmunotherapy。让我们一起学习作者的研究思路。

现有的靶向CD8阳性T细胞的免疫检查点抑制剂只显示出有限的疗效，这是由于有多种免疫检查点通路存在。因此，亟需开发新的免疫检查点和联合治疗方法。

单胺氧化酶(monoamineoxidase,MAO-A)是催化单胺类物质氧化脱氨反应的酶。MAO-A存在于细胞的线粒体外膜上，在神经中枢系统和神经末梢组织中扮演着重要角色，目前MAO-A抑制药物在治疗抑郁症、抗帕金森病和阿尔茨海默病中具有不可替代的重要作用。然而，在大脑外的功能特别是参与抗肿瘤免疫尚不清楚。

1.MAO-A的缺乏增强CD8+T细胞抗肿瘤免疫

为了寻找调节抗肿瘤免疫的新靶点，作者首先构建小鼠模型分离肿瘤浸润性免疫细胞（tumor-infiltratingimmunecells,TIIs），通过q-PCR分析发现了TIIs中MAO-A的差异表达。随后采用结直肠癌和黑色素瘤两种肿瘤模型，发现敲除MAO-A的小鼠中两种肿瘤细胞生长都受到抑制，并且这些小鼠TIIs中IFN-γ和颗粒酶B的分泌增加、PD-1表达降低。此外单细胞RNA测序（scRNA-seq）的结果表明，MAO-A在调节抗肿瘤CD8+T细胞的产生/维持方面可能发挥作用。

（在动物体内验证均采用了两种肿瘤模型，不仅加强了结果的可信性，还排除了肿瘤特异性。）

2.MAO-A直接调节CD8+T细胞抗肿瘤免疫

为验证MAO-A与T细胞的相互作用，作者在动物层面和细胞层面进行双验证。首先进行双向骨髓移植实验，即通过向CD45.1小鼠中注射（MAO-A-KO/MAO-A-WT）CD45.2小鼠的骨髓，向（MAO-A-KO/MAO-A-WT）CD45.2小鼠中注射CD45.1小鼠的骨髓，发现只有当免疫细胞缺乏MAO-A时，才能抑制肿瘤生长。然后利用OT1T细胞转移实验，即用OT1小鼠培育出MAO-A-KO和MAO-A-WT细胞再注射入B16-OVA小鼠体内，表明MAO-A是直接调节CD8+T细胞的抗肿瘤免疫作用。并且体外原代细胞层面的研究同样揭示了MAO-A对CD8+T细胞呈负调控。

3.MAO-A调节CD8+T细胞自分泌血清素信号传导

找到MAO-A作用途径，接下来就是机制层面的研究了。已知CD8+T细胞合成血清素（serotonin），且MAO-A是血清素的上游因子。作者通过体外加入血清素或用其抑制剂（ASE）处理，表明血清素可增强CD8+T细胞的活化，而抑制血清素可逆转阻断MAO-A引起的CD8+T细胞的细胞毒性增强。表明阻断MAO-A可通过调节CD8+T细胞的血清素-MAPK信号通路来增强CD8+T细胞的抗肿瘤免疫作用。

4.MOA-A阻断剂的小鼠肿瘤模型研究

前部分研究得出阻断MAO-A在增强CD8+T细胞的抗肿瘤免疫方面的作用。作者进而利用临床MAO-A的抑制剂（Phe、Moc、Clo）进行小鼠肿瘤模型的研究，结果表明抑制MAO-A能有效抑制肿瘤的生长，且对肿瘤内T细胞流式分析发现T细胞毒性增强，免疫抑制力减弱。（老药新用，必定要将临床使用药物拿来试试水。）

5.人T细胞和临床数据相关研究

最后，作者进行了临床相关研究，利用人类T细胞异种移植模型，并研究黑色素瘤、结肠癌癌症患者瘤内MAO-A基因表达与CD8+T细胞抗肿瘤活性和临床生存率的相关性。揭示了MAO-A阻断用于癌症免疫治疗的潜力。（肿瘤的研究最终回归于临床是大多数高分文章的必选之路，通过分析相关因子的临床病理特征揭示研究意义和价值。）

抗癌药物的研发始终是癌症研究的重点领域。虽然癌症治疗药物的市场极大，且在研抗癌药物数量庞大，但目前上市抗癌药物仍然较少，这表明了药物研发的困难程度。而“老药新用”的研发思路可以极大地减少药物上市前临床试验的时间精力财力，是有重大潜力的研究方向。

本文就是一篇“老药新用”的好文。文章中作者通过研究了MAO-A在调节CD8T细胞抗肿瘤免疫中的作用，并评估了使用敲除和转基因小鼠、临床前小鼠同基因和人类异种移植肿瘤模型将MAO抑制剂重新用于癌症免疫治疗的可能性，以及临床数据相关研究。应用两种肿瘤模型，以及体内体外的细胞研究，系统地论明了将已应用于临床的MAO抗抑郁药重新用于癌症免疫治疗的潜力。

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